LC-MS在生物制藥分析新趨勢 - HCPs殘留的分析

HCPs監(jiān)測是生物藥生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA），需要在開發(fā)和生產(chǎn)過程中對其存在進行監(jiān)測、控制和記錄。而選擇合適的方法與可靠的試劑也十分關(guān)鍵。LC-MS方法分析HCPs的使用可以彌補HCP-ELISA方法的不足，如識別和量化單個HCP的能力，無需依賴抗HCP抗體。因此，該方法的應(yīng)用及相應(yīng)的監(jiān)管要求在未來可能會增加。

LC-MS方法對生物藥物開發(fā)有諸多好處

1. 可確定原液中HCP，并比較GMP生產(chǎn)條件下的批間差異；

2. 可鑒定對患者安全和產(chǎn)品穩(wěn)定性有潛在影響的特定種類HCPs；

3. 可用于評價純化過程中去除特定HCP的效果，例如高豐度的HCPs和潛在風險因子HCPs。

每個純化步驟后的HCP譜可以起到控制雜質(zhì)清除的目的，并證明生產(chǎn)的一致性和穩(wěn)健性。此外，LC-MS可以用于復(fù)雜生物藥物的蛋白雜質(zhì)分析，如病*疫苗和基因治療產(chǎn)品。這類產(chǎn)品的工藝相關(guān)雜質(zhì)來自多種生物體以及其他多種來源，包括人源細胞系、重組血清白蛋白、核*酶，以及制造過程中使用的其他酶等。

2017 年以來，有多家生物制藥公司已通過LC-MS方法分析各種蛋白質(zhì)生物藥物中的HCP，包括單克隆抗體、疫苗和其他生物制劑。不同的品牌儀器，不同的數(shù)據(jù)庫軟件，不同的量化方法都能得到可靠的分析結(jié)果。

當選擇LC-MS作為生物制藥HCP分析方法時，無論是定量方法還是定性方法，都有必要進行適用性驗證。LC-MS方法分析HCP比較復(fù)雜，重現(xiàn)性非常重要。該方法由多個步驟組成，包括：蛋白變性、還原、烷基化、胰酶消化為肽段，肽段通過HPLC柱分離，并通過MS進行分析。樣品可能被消化為數(shù)千個肽段，產(chǎn)生數(shù)千張MS圖譜。因此，整合及在過程中建立內(nèi)部控制品（QC）就至關(guān)重要，重復(fù)性和靈敏度也是質(zhì)譜系統(tǒng)至關(guān)重要的參數(shù)。